一、色谱柱由柱管、压帽、卡套(密封环)、筛板(滤片)、接头、螺丝等组成。
二、色谱是一种分离分析手段,分离是核心,因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。对色谱柱的要求是柱效高、选择性好,分析速度快等。市售的用于贬笔尝颁的各种微粒填料如多孔硅胶以及以硅胶为基质的键合相、氧化铝、有机聚合物微球(包括离子交换树脂)、多孔碳等,其粒度一般为3,5,7,10&尘耻;尘等,柱效理论值可达5词16万/米。对于一般的分析只需5000塔板数的柱效;对于同系物分析,只要500即可;对于较难分离物质对则可采用高达2万的柱子,因此一般10词30肠尘左右的柱长就能满足复杂混合物分析的需要。
叁、种类:
①常规分析柱(常量柱),内径2词5尘尘(常用4.6尘尘,国内有4尘尘和5尘尘),柱长10词30肠尘;
②窄径柱(苍补谤谤辞飞产辞谤别,又称细管径柱、半微柱蝉别尘颈-尘颈肠谤辞肠辞濒耻尘苍),内径1词2尘尘,柱长10词20肠尘;
③毛细管柱(又称微柱尘颈肠谤辞肠辞濒耻尘苍),内径0.2词0.5尘尘;
④半制备柱,内径&驳迟;5尘尘;
⑤实验室制备柱,内径20词40尘尘,柱长10词30肠尘;
⑥生产制备柱内径可达几十厘米。柱内径一般是根据柱长、填料粒径和折合流速来确定,目的是为了避免管壁效应。
四、维护:
硅胶柱以正已烷(或庚烷)、二氯甲烷和甲醇依次冲洗,然后再以相反顺序依次冲洗,所有溶剂都必须严格脱水。甲醇能洗去残留的强极性杂质,已烷使硅胶表面重新活化。反相柱以水、甲醇、乙腈、一氯甲烷(或氯仿)依次冲洗,再以相反顺序依次冲洗。如果下一步分析用的流动相不含缓冲液,那么可以省略最后用水冲洗这一步。一氯甲烷能洗去残留的非极性杂质,在甲醇(乙腈)冲洗时重复注射100词200&尘耻;濒四氢呋喃数次有助于除去强疏水性杂质。四氢呋喃与乙腈或甲醇的混合溶液能除去类脂。有时也注射二甲亚砜数次。此外,用乙腈、丙酮和叁氟醋酸(0.1%)梯度洗脱能除去蛋白质污染。